मेणबत्ती आणि साबण बनवण्यासाठी शुद्ध सपोश्निकोव्हिया डिव्हारिकाटा तेल घाऊक डिफ्यूझर आवश्यक तेल रीड बर्नर डिफ्यूझर्ससाठी नवीन

संक्षिप्त वर्णन:

२.१. एसडीईची तयारी

एसडीचे राईझोम्स हॅनहर्ब कंपनी (गुरी, कोरिया) कडून वाळलेल्या औषधी वनस्पती म्हणून खरेदी केले गेले. कोरिया इन्स्टिट्यूट ऑफ ओरिएंटल मेडिसिन (KIOM) च्या डॉ. गो-या चोई यांनी वनस्पती सामग्रीची वर्गीकरणानुसार पुष्टी केली. एक व्हाउचर नमुना (क्रमांक २०१४ एसडीई-६) कोरियन हर्बेरियम ऑफ स्टँडर्ड हर्बल रिसोर्सेसमध्ये जमा करण्यात आला. एसडीचे वाळलेले राईझोम्स (३२० ग्रॅम) ७०% इथेनॉल (२ तासांच्या रिफ्लक्ससह) वापरून दोनदा काढले गेले आणि नंतर अर्क कमी दाबाने केंद्रित केला गेला. डेकोक्शन फिल्टर केले गेले, लायोफिलाइज केले गेले आणि ४°C वर साठवले गेले. कच्च्या सुरुवातीच्या पदार्थांपासून वाळलेल्या अर्काचे उत्पादन ४८.१३% (w/w) होते.

२.२. क्वांटिटेटिव्ह हाय-परफॉर्मन्स लिक्विड क्रोमॅटोग्राफी (HPLC) विश्लेषण

क्रोमॅटोग्राफिक विश्लेषण एचपीएलसी सिस्टम (वॉटर्स कंपनी, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए) आणि फोटोडायोड अ‍ॅरे डिटेक्टर वापरून केले गेले. एसडीईच्या एचपीएलसी विश्लेषणासाठी, प्राथमिक-O-ग्लुकोसिलसिमिफ्यूगिन मानक कोरिया प्रमोशन इन्स्टिट्यूट फॉर ट्रॅडिशनल मेडिसिन इंडस्ट्री (ग्योंगसान, कोरिया) कडून खरेदी केले गेले होते, आणिसेकंद-ओ-ग्लुकोसिलहामॉडॉल आणि ४′-O-β-डी-ग्लुकोसिल-५-O-मिथाइलविसामिनॉल आमच्या प्रयोगशाळेत वेगळे केले गेले आणि वर्णक्रमीय विश्लेषणाद्वारे ओळखले गेले, प्रामुख्याने NMR आणि MS द्वारे.

SDE नमुने (0.1 mg) 70% इथेनॉल (10 mL) मध्ये विरघळवले गेले. XSelect HSS T3 C18 कॉलम (4.6 × 250 मिमी, 5μमी, वॉटर्स कंपनी, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए). मोबाईल फेजमध्ये एसीटोनिट्राइल (ए) आणि पाण्यात (बी) ०.१% एसिटिक अॅसिड १.० मिली/मिनिट या प्रवाह दराने समाविष्ट होते. एक मल्टीस्टेप ग्रेडियंट प्रोग्राम खालीलप्रमाणे वापरला गेला: ५% ए (० मि), ५–२०% ए (०–१० मि), २०% ए (१०–२३ मि), आणि २०–६५% ए (२३–४० मि). डिटेक्शन वेव्हलेन्थ २१०–४०० एनएमवर स्कॅन करण्यात आली आणि २५४ एनएमवर रेकॉर्ड करण्यात आली. इंजेक्शन व्हॉल्यूम १०.० होता.μL. तीन क्रोमोन्सच्या निर्धारणासाठी मानक द्रावण 7.781 mg/mL च्या अंतिम सांद्रतेवर तयार केले गेले (प्राथमिक-O-ग्लुकोसिलसिमिफ्यूगिन), ३१.१२५ मिग्रॅ/मिली (४′-O-β-डी-ग्लुकोसिल-५-O-मिथाइलविसामिनॉल), आणि ३१.१२५ मिग्रॅ/मिली (सेकंद-ओ-ग्लुकोसिलहामॉडॉल) मिथेनॉलमध्ये आणि ४°C वर ठेवले जाते.

२.३. दाहक-विरोधी क्रियाकलापांचे मूल्यांकनइन व्हिट्रो

२.३.१. पेशी संवर्धन आणि नमुना उपचार

RAW 264.7 पेशी अमेरिकन टाइप कल्चर कलेक्शन (ATCC, Manassas, VA, USA) मधून मिळवल्या गेल्या आणि 1% अँटीबायोटिक्स आणि 5.5% FBS असलेल्या DMEM माध्यमात वाढवल्या गेल्या. पेशी 37°C वर 5% CO2 च्या आर्द्र वातावरणात उष्मायन करण्यात आल्या. पेशींना उत्तेजित करण्यासाठी, माध्यम ताज्या DMEM माध्यमाने आणि 1 वाजता लिपोपॉलिसॅकराइड (LPS, सिग्मा-अल्ड्रिच केमिकल कंपनी, सेंट लुईस, MO, USA) ने बदलले गेले.μएसडीई (२०० किंवा ४००) च्या उपस्थितीत किंवा अनुपस्थितीत ग्रॅम/मिली जोडण्यात आले.μग्रॅम/मिली) अतिरिक्त २४ तासांसाठी.

२.३.२. नायट्रिक ऑक्साईड (NO), प्रोस्टाग्लॅंडिन E2 (PGE2), ट्यूमर नेक्रोसिस फॅक्टरचे निर्धारण-α(टीएनएफ-α), आणि इंटरल्यूकिन-6 (IL-6) उत्पादन

पेशींवर SDE ने उपचार केले गेले आणि २४ तास LPS ने उत्तेजित केले गेले. मागील अभ्यासानुसार ग्रीस अभिकर्मक वापरून नायट्रेट मोजून NO उत्पादनाचे विश्लेषण केले गेले [12]. दाहक सायटोकिन्स PGE2, TNF- चे स्रावα, आणि उत्पादकाच्या सूचनांनुसार ELISA किट (R&D सिस्टीम) वापरून IL-6 निश्चित केले गेले. NO आणि सायटोकाइन उत्पादनावर SDE चे परिणाम 540 nm किंवा 450 nm वर Wallac EnVision वापरून निश्चित केले गेले.™मायक्रोप्लेट रीडर (पर्किनएल्मर).

२.४. अस्थिरोगविरोधी क्रियाकलापांचे मूल्यांकनव्हिवो मध्ये

२.४.१. प्राणी

नर स्प्रेग-डॉली उंदीर (७ आठवडे वयाचे) समताको इंक. (ओसान, कोरिया) कडून खरेदी केले गेले आणि त्यांना नियंत्रित परिस्थितीत १२ तासांच्या प्रकाश/अंधार चक्रासह ठेवण्यात आले.°C आणि% आर्द्रता. उंदरांना प्रयोगशाळेतील आहार आणि पाणी देण्यात आले.परवानगीशिवाय. सर्व प्रायोगिक प्रक्रिया राष्ट्रीय आरोग्य संस्था (NIH) च्या मार्गदर्शक तत्वांचे पालन करून केल्या गेल्या आणि डेजॉन विद्यापीठाच्या (डेजॉन, कोरिया प्रजासत्ताक) प्राण्यांची काळजी आणि वापर समितीने मंजूर केल्या.

२.४.२. उंदरांमध्ये MIA सह OA चे प्रेरण

अभ्यास सुरू होण्यापूर्वी प्राण्यांना यादृच्छिकरित्या निवडण्यात आले आणि उपचार गटांना नियुक्त करण्यात आले (प्रति गट). एमआयए द्रावण (३ मिग्रॅ/५०)μकेटामाइन आणि झायलाझिनच्या मिश्रणाने भूल देऊन उजव्या गुडघ्याच्या आतील-सांध्यासंबंधी जागेत ०.९% सलाईनचे एल) थेट इंजेक्ट केले गेले. उंदरांना यादृच्छिकपणे चार गटांमध्ये विभागले गेले: (१) एमआयए इंजेक्शन नसलेला सलाईन गट, (२) एमआयए इंजेक्शनसह एमआयए गट, (३) एमआयए इंजेक्शनसह एसडीई-उपचारित गट (२०० मिग्रॅ/किलो) आणि (४) एमआयए इंजेक्शनसह इंडोमेथेसिन- (आयएम-)उपचारित गट (२ मिग्रॅ/किलो). एमआयए इंजेक्शनच्या १ आठवडा आधी ४ आठवडे उंदरांना एसडीई आणि आयएम तोंडावाटे देण्यात आले. या अभ्यासात वापरल्या जाणाऱ्या एसडीई आणि आयएमचा डोस मागील अभ्यासांमध्ये वापरल्या जाणाऱ्यांवर आधारित होता [10,13,14].

२.४.३. हिंदपॉ वजन-वाहक वितरणाचे मोजमाप

OA प्रेरणानंतर, मागच्या पायांच्या वजन उचलण्याच्या क्षमतेतील मूळ संतुलन बिघडले. वजन उचलण्याच्या सहनशीलतेतील बदलांचे मूल्यांकन करण्यासाठी एक इनकॅपेसिटान्स टेस्टर (लिंटन इन्स्ट्रुमेंटेशन, नॉरफोक, यूके) वापरण्यात आला. उंदरांना काळजीपूर्वक मोजमाप कक्षात ठेवण्यात आले. मागच्या पायाने लावलेल्या वजन उचलण्याच्या शक्तीचे सरासरी 3 सेकंदांच्या कालावधीत मूल्यांकन करण्यात आले. वजन वितरण गुणोत्तर खालील समीकरणाद्वारे मोजले गेले: [उजव्या मागच्या पायावरील वजन/(उजव्या मागच्या पायावरील वजन + डाव्या मागच्या पायावरील वजन)] × 100 [15].

२.४.४. सीरम सायटोकाइन पातळीचे मोजमाप

रक्ताचे नमुने १,५०० ग्रॅमवर ४°C वर १० मिनिटांसाठी सेंट्रीफ्यूज केले गेले; नंतर सीरम गोळा केले गेले आणि वापर होईपर्यंत -७०°C वर साठवले गेले. IL-1 चे स्तरβ, आयएल-६, टीएनएफ-α, आणि सीरममधील PGE2 चे मोजमाप उत्पादकाच्या सूचनांनुसार R&D सिस्टीम्स (मिनियापोलिस, MN, USA) मधील ELISA किट वापरून केले गेले.

२.४.५. रिअल-टाइम क्वांटिटेटिव्ह आरटी-पीसीआर विश्लेषण

गुडघ्याच्या सांध्यातील ऊतींमधून एकूण आरएनए TRI reagent® (सिग्मा-अल्ड्रिच, सेंट लुईस, MO, USA) वापरून काढण्यात आला, cDNA मध्ये उलटे ट्रान्सक्राइब केले गेले आणि SYBR ग्रीन (अ‍ॅप्लाईड बायोसिस्टम्स, ग्रँड आयलंड, NY, USA) वापरून TM वन स्टेप RT PCR किट वापरून PCR-एम्प्लीफाय केले गेले. अ‍ॅप्लाईड बायोसिस्टम्स 7500 रिअल-टाइम PCR सिस्टीम (अ‍ॅप्लाईड बायोसिस्टम्स, ग्रँड आयलंड, NY, USA) वापरून रिअल-टाइम क्वांटिटेटिव्ह PCR करण्यात आला. प्राइमर सीक्वेन्स आणि प्रोब-सीक्वेन्स टेबलमध्ये दाखवले आहेत.1. उत्पादकाच्या सूचनांनुसार (अप्लाइड बायोसिस्टम्स, फोस्टर, सीए, यूएसए) डीएनए पॉलिमरेज असलेल्या टॅकमन® युनिव्हर्सल पीसीआर मास्टर मिश्रणाने नमुना सीडीएनए आणि समान प्रमाणात जीएपीडीएच सीडीएनएचे प्रमाण वाढवले गेले. ४० चक्रांसाठी पीसीआर स्थिती ५०°C वर २ मिनिटे, ९४°C वर १० मिनिटे, ९५°C वर १५ सेकंद आणि ६०°C वर १ मिनिट होती. उत्पादकाच्या सूचनांनुसार, तुलनात्मक सीटी (एम्प्लिफिकेशन प्लॉट आणि थ्रेशोल्डमधील क्रॉस-पॉइंटवर थ्रेशोल्ड सायकल क्रमांक) पद्धती वापरून लक्ष्य जनुकाची एकाग्रता निश्चित केली गेली.

एफओबी किंमत:यूएस $०.५ - ९,९९९ / तुकडा

किमान ऑर्डर प्रमाण:१०० तुकडे/तुकडे

पुरवठा क्षमता:दरमहा १०००० तुकडे/तुकडे

आम्हाला ईमेल पाठवा

उत्पादन तपशील

उत्पादन टॅग्ज

ऑस्टियोआर्थरायटिस (OA) हा वृद्धांमध्ये सर्वात सामान्य मस्क्यूकोस्केलेटल डिसऑर्डर आणि सर्वात सामान्य डीजनरेटिव्ह सांधे रोग आहे [1]. OA ही एक अशी स्थिती आहे जी काही प्रमाणात दुखापत, कूर्चाची रचना आणि कार्य कमी होणे आणि प्रोइंफ्लेमेटरी आणि अँटी-इंफ्लेमेटरी मार्गांचे नियमन बिघडल्याने होते [2,3]. हे प्रामुख्याने सायनोव्हियल सांध्यातील सांध्यासंबंधी कूर्चा आणि सबकॉन्ड्रल हाडांवर परिणाम करते आणि परिणामी सांधे निकामी होतात, ज्यामुळे चालताना आणि उभे राहताना वजन उचलताना वेदना होतात [4].

OA वर कोणताही इलाज नाही, कारण एकदा कार्टिलेज नष्ट झाले की ते पुनर्संचयित करणे खूप कठीण असते [5]. उपचारांची उद्दिष्टे वेदना कमी करणे, सांध्याची गतिशीलता राखणे किंवा सुधारणे, सांध्याची ताकद वाढवणे आणि रोगाचे अशक्त करणारे परिणाम कमी करणे हे आहेत. OA च्या औषधीय उपचारांचा उद्देश रुग्णाच्या सांध्याचे कार्य आणि जीवनमान वाढविण्यासाठी वेदना कमी करणे आहे. जरी OA मध्ये कूर्चा नष्ट होणे ही मुख्य घटना असली तरी, कोलेजनचे ऱ्हास ही मूलभूत घटना आहे जी जळजळीच्या संबंधात OA ची अपरिवर्तनीय प्रगती निश्चित करते [6,7]. OA रुग्णांमध्ये दाहक-विरोधी आणि कॉन्ड्रोप्रोटेक्टिव्ह क्रियाकलाप असलेल्या उपचारांमुळे वेदना कमी होतील आणि मॅट्रिक्स अखंडता राखली जाईल अशी अपेक्षा आहे.

म्हणून, OA व्यवस्थापनात जळजळ कमी करणे फायदेशीर ठरेल. अलीकडील अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की OA च्या प्रगतीवर हर्बल संसाधनांची संरक्षणात्मक भूमिका, कॉन्ड्रोसाइट जळजळ कमी करण्याच्या आणि पुढील कूर्चा नष्ट करण्याच्या दृष्टीने, सांधे-संबंधित ऊतींशी संवाद साधण्याच्या त्यांच्या क्षमतेद्वारे, ज्यामुळे सांधेदुखी कमी होते [8].

चे मूळसपोश्निकोव्हिया डिव्हारिकाटाकोरिया आणि चीनमध्ये डोकेदुखी, वेदना, जळजळ आणि संधिवात यांच्या उपचारांसाठी पारंपारिक औषधांमध्ये शिश्किन (उम्बेलिफेरे) चा मोठ्या प्रमाणावर वापर केला जातो [9,10]. चे विविध औषधीय परिणामसपोश्निकोव्हिया डिव्हारिकाटा(SD) मध्ये दाहक-विरोधी, वेदनाशामक, अँटीपायरेटिक आणि संधिवातविरोधी गुणधर्म देखील समाविष्ट आहेत [9,11]. अलीकडील एका अभ्यासात असे दिसून आले आहे की कोलेजन-प्रेरित संधिवाताच्या माऊस मॉडेलमध्ये एसडी क्रोमोन अर्कमध्ये संभाव्य अँटी-रुमेटॉइड संधिवात प्रभाव आहेत [10]; तथापि, दाहक-विरोधी आणि संधिवातविरोधी क्रियाकलापांना समर्थन देण्यासाठी फार कमी अभ्यास केले गेले आहेतसपोश्निकोव्हिया डिव्हारिकाटाअर्क (SDE).

म्हणून, या अभ्यासात SD च्या 70% इथेनॉल अर्कच्या दाहक-विरोधी आणि अस्थिरोगविरोधी क्रियाकलापांची तपासणी करण्यात आली. प्रथम, SDE च्या दाहक-विरोधी प्रभावाचे मूल्यांकन करण्यात आले.इन विट्रोLPS-प्रेरित RAW 264.7 पेशींमध्ये. पुढे, मोनोसोडियम आयोडोएसीटेट- (MIA-)प्रेरित OA च्या उंदराच्या मॉडेलमध्ये वजन-वाहक वितरण, सांध्यासंबंधी कूर्चाचे ऱ्हास आणि दाहक प्रतिक्रियांचे मूल्यांकन करून SDE चा अँटीऑस्टियोआर्थरायटिस प्रभाव मोजला गेला.