ऑस्टियोआर्थरायटिस (OA) हा दीर्घकालीन क्रॉनिक डिजनरेटिव्ह हाडांच्या सांध्यातील आजारांपैकी एक आहे जो 65 वर्षांपेक्षा जास्त वयाच्या लोकांना प्रभावित करतो.
1]. सामान्यतः, OA रूग्णांना खराब झालेले उपास्थि, सूजलेले सायनोव्हियम आणि खोडलेल्या कॉन्ड्रोसाइट्सचे निदान केले जाते, ज्यामुळे वेदना आणि शारीरिक त्रास होतो [
2]. संधिवात वेदना मुख्यतः जळजळीमुळे सांध्यातील कूर्चाच्या ऱ्हासामुळे होते आणि जेव्हा उपास्थि गंभीरपणे खराब होते तेव्हा हाडे एकमेकांवर आदळतात ज्यामुळे असह्य वेदना आणि शारीरिक त्रास होतो [
3]. वेदना, सूज आणि सांधे कडक होणे यासारख्या लक्षणांसह दाहक मध्यस्थांचा सहभाग चांगल्या प्रकारे दस्तऐवजीकरण आहे. OA रूग्णांमध्ये, दाहक साइटोकिन्स, ज्यामुळे उपास्थि आणि सबकॉन्ड्रल हाडांची झीज होते, सायनोव्हियल द्रवपदार्थात आढळतात [
4]. OA रुग्णांना सामान्यतः वेदना आणि सायनोव्हीयल जळजळ या दोन प्रमुख तक्रारी असतात. त्यामुळे सध्याच्या OA थेरपींची प्राथमिक उद्दिष्टे म्हणजे वेदना आणि जळजळ कमी करणे. [
5]. नॉन-स्टेरॉइडल आणि स्टिरॉइडल औषधांसह उपलब्ध OA उपचारांनी वेदना आणि जळजळ कमी करण्यात परिणामकारकता सिद्ध केली असली तरी, या औषधांच्या दीर्घकालीन वापरामुळे हृदय व रक्तवाहिन्यासंबंधी, गॅस्ट्रो-आतड्यांसंबंधी आणि मूत्रपिंडासंबंधी बिघडलेले कार्य यासारखे गंभीर आरोग्यावर परिणाम होतात.
6]. अशा प्रकारे, ऑस्टियोआर्थरायटिसच्या उपचारांसाठी कमी दुष्परिणामांसह अधिक प्रभावी औषध विकसित करावे लागेल.
नैसर्गिक आरोग्य उत्पादने सुरक्षित आणि सहज उपलब्ध असल्याने अधिक लोकप्रिय होत आहेत [
7]. पारंपारिक कोरियन औषधांनी आर्थरायटिससह अनेक दाहक रोगांवर परिणामकारकता सिद्ध केली आहे [
8]. ऑकलंडिया लप्पा डीसी. त्याच्या औषधी गुणधर्मांसाठी ओळखले जाते, जसे की वेदना कमी करण्यासाठी आणि पोटाला शांत करण्यासाठी क्यूईचे रक्ताभिसरण वाढवणे, आणि पारंपारिकपणे नैसर्गिक वेदनाशामक म्हणून वापरले जाते [
9]. मागील अहवाल सूचित करतात की ए. लप्पामध्ये दाहक-विरोधी आहे [
10,
11], वेदनाशामक [
12], कर्करोगविरोधी [
13], आणि गॅस्ट्रोप्रोटेक्टिव्ह [
14] प्रभाव. A. lappa च्या विविध जैविक क्रिया त्याच्या प्रमुख सक्रिय संयुगांमुळे होतात: कॉस्टुनोलाइड, डिहाइड्रोकोस्टस लैक्टोन, डायहाइड्रोकोस्टुनोलाइड, कॉस्टस्लॅक्टोन, α-कॉस्टॉल, सॉस्युरिया लैक्टोन आणि कॉस्टुस्लेक्टोन [
15]. पूर्वीच्या अभ्यासात असा दावा केला गेला आहे की कॉस्टुनोलाइडने लिपोपोलिसेकेराइड (एलपीएस) मध्ये दाहक-विरोधी गुणधर्म दर्शविल्या, ज्याने एनएफ-केबी आणि उष्मा शॉक प्रोटीन मार्गाच्या नियमनद्वारे मॅक्रोफेजेस प्रेरित केले.
16,
17]. तथापि, OA उपचारांसाठी A. lappa च्या संभाव्य क्रियाकलापांचा कोणताही अभ्यास तपासला गेला नाही. सध्याच्या संशोधनात (मोनोसोडियम-आयोडोएसीटेट) MIA आणि एसिटिक ऍसिड-प्रेरित उंदीर मॉडेलचा वापर करून OA विरुद्ध A. lappa च्या उपचारात्मक प्रभावांची तपासणी करण्यात आली आहे.
मोनोसोडियम-आयोडोएसीटेट (एमआयए) प्रसिद्धपणे प्राण्यांमध्ये वेदना वर्तणूक आणि OA ची पॅथोफिजियोलॉजिकल वैशिष्ट्ये तयार करण्यासाठी वापरली जाते.
18,
19,
20]. गुडघ्याच्या सांध्यामध्ये इंजेक्शन दिल्यावर, एमआयए कॉन्ड्रोसाइट चयापचय विस्कळीत करते आणि जळजळ आणि दाहक लक्षणांना प्रेरित करते, जसे की उपास्थि आणि सबकॉन्ड्रल हाडांची झीज, OA ची मुख्य लक्षणे [
18]. एसिटिक ऍसिडसह प्रेरीत प्रतिक्रिया हे प्राण्यांमध्ये परिधीय वेदनांचे अनुकरण मानले जाते जेथे दाहक वेदना परिमाणवाचकपणे मोजल्या जाऊ शकतात [
19]. माऊस मॅक्रोफेज सेल लाइन, RAW264.7, जळजळीच्या सेल्युलर प्रतिसादांचा अभ्यास करण्यासाठी लोकप्रियपणे वापरली जाते. LPS सह सक्रिय केल्यावर, RAW264 मॅक्रोफेजेस दाहक मार्ग सक्रिय करतात आणि TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS आणि IL-6 सारखे अनेक दाहक मध्यस्थ स्राव करतात.
20]. या अभ्यासाने MIA प्राणी मॉडेल, एसिटिक ऍसिड-प्रेरित प्राणी मॉडेल आणि LPS-सक्रिय RAW264.7 पेशींमध्ये OA विरुद्ध A. lappa च्या अँटी-नोसिसेप्टिव्ह आणि विरोधी दाहक प्रभावांचे मूल्यांकन केले आहे.
2. साहित्य आणि पद्धती
२.१. वनस्पती साहित्य
A. लप्पा DC चे वाळलेले मूळ. प्रयोगात वापरलेले एप्युलिप फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड, (सोल, कोरिया) कडून खरेदी केले गेले. हे प्रो. डोंगहुन ली, हर्बल फार्माकोलॉजी विभाग, कोरियन मेडिसिनचे कर्नल, गॅचोन विद्यापीठ यांनी ओळखले आणि व्हाउचर नमुना क्रमांक 18060301 म्हणून जमा केला.
२.२. ए. लप्पा एक्स्ट्रॅक्टचे एचपीएलसी विश्लेषण
ए. लप्पा हे रिफ्लक्स उपकरण वापरून काढले गेले (डिस्टिल्ड वॉटर, 100 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 3 तास). काढलेले द्रावण कमी-दाब बाष्पीभवक वापरून फिल्टर आणि घनरूप केले गेले. A. लप्पा अर्काचे −80 °C तापमानात फ्रीझ-ड्रायिंगनंतर 44.69% उत्पादन होते. A. lappa चे क्रोमॅटोग्राफिक विश्लेषण 1260 InfinityⅡ HPLC-सिस्टम (Agilent, Pal Alto, CA, USA) वापरून कनेक्ट केलेल्या HPLC सह आयोजित केले गेले. रंगीत पृथक्करणासाठी, EclipseXDB C18 स्तंभ (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) 35 °C वर वापरला गेला. एकूण 100 मिग्रॅ नमुना 50% मिथेनॉलच्या 10 एमएलमध्ये पातळ केले गेले आणि 10 मिनिटांसाठी सॉनिक केले गेले. नमुने 0.45 μm च्या सिरिंज फिल्टर (वॉटर कॉर्प, मिलफोर्ड, एमए, यूएसए) सह फिल्टर केले गेले. मोबाईल फेजची रचना 0.1% फॉस्फोरिक ऍसिड (A) आणि एसीटोनिट्रिल (B) होती आणि स्तंभ खालीलप्रमाणे उलगडला होता: 0-60 मि, 0%; 60-65 मिनिटे, 100%; 65-67 मिनिटे, 100%; ६७–७२ मिनिटे, १.० मिली/मिनिट प्रवाह दरासह ०% विद्रावक बी. 10 μL च्या इंजेक्शन व्हॉल्यूमचा वापर करून 210 nm वर सांडपाणी आढळून आले. विश्लेषण ट्रिपलीकेटमध्ये केले गेले.
२.३. पशु गृहनिर्माण आणि व्यवस्थापन
5 आठवडे वयाचे नर स्प्रेग-डॉले (SD) उंदीर आणि 6 आठवडे वयाचे नर ICR उंदीर Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) कडून खरेदी केले गेले. सतत तापमान (22 ± 2 °C) आणि आर्द्रता (55 ± 10%) आणि 12/12 तासांचे प्रकाश/गडद चक्र वापरून प्राण्यांना खोलीत ठेवले होते. प्रयोग सुरू होण्यापूर्वी प्राण्यांना एक आठवड्यापेक्षा जास्त काळ स्थितीची माहिती होती. प्राण्यांना खाद्य आणि पाण्याचा पुरवठा होता. Gachon विद्यापीठ (GIACUC-R2019003) मधील प्राण्यांची काळजी आणि हाताळणीसाठी सध्याचे नैतिक नियम सर्व प्राण्यांच्या प्रायोगिक प्रक्रियेमध्ये काटेकोरपणे पाळले गेले. अभ्यासाची रचना अन्वेषक-अंध आणि समांतर चाचणी करण्यात आली होती. प्राणी प्रायोगिक नीतिशास्त्र समितीच्या मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार आम्ही इच्छामरण पद्धतीचा अवलंब केला.
२.४. MIA इंजेक्शन आणि उपचार
उंदीर यादृच्छिकपणे 4 गटांमध्ये विभागले गेले होते, ते म्हणजे शॅम, कंट्रोल, इंडोमेथेसिन आणि ए. लप्पा. 2% आयसोफ्लुओरेन O2 मिश्रणाने भूल दिल्याने, प्रायोगिक OA होण्यासाठी उंदरांना 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) इंट्रा-आर्टिक्युलरपणे गुडघ्याच्या सांध्यामध्ये इंजेक्शन दिले गेले. उपचार खालीलप्रमाणे आयोजित केले गेले: नियंत्रण आणि शेम गट केवळ AIN-93G मूलभूत आहारासह राखले गेले. फक्त, इंडोमेथेसिन ग्रुपला AIN-93G आहारामध्ये समाविष्ट केलेले इंडोमेथेसिन (3 mg/kg) प्रदान करण्यात आले आणि A. lappa 300 mg/kg गट A. lappa (300 mg/kg) सह पूरक असलेल्या AIN-93G आहारासाठी नियुक्त केले गेले. OA इंडक्शनच्या दिवसापासून 24 दिवस प्रतिदिन 190-210 ग्रॅम शरीराचे वजन 15-17 ग्रॅम दराने उपचार चालू ठेवले गेले.
२.५. वजन बेअरिंग मापन
OA इंडक्शननंतर, उंदरांच्या मागच्या अंगांचे वजन-पहन क्षमता मोजमाप नियोजित प्रमाणे incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) सह केले गेले. मागील अंगावरील वजन वितरणाची गणना केली गेली: वजन सहन करण्याची क्षमता (%)
