ऑस्टियोआर्थरायटिस (OA) हा हाडांच्या सांध्यातील दीर्घकालीन क्षीण होणार्‍या आजारांपैकी एक आहे जो ६५ वर्षांपेक्षा जास्त वयाच्या लोकांना प्रभावित करतो [
1]. साधारणपणे, OA रुग्णांना खराब झालेले कूर्चा, सूजलेले सायनोव्हियम आणि क्षरण झालेले कॉन्ड्रोसाइट्स असल्याचे निदान केले जाते, ज्यामुळे वेदना आणि शारीरिक त्रास होतो [
2]. सांधेदुखी प्रामुख्याने सांध्यातील कूर्चाच्या जळजळीमुळे झीज झाल्यामुळे होते आणि जेव्हा कूर्चाला गंभीर नुकसान होते तेव्हा हाडे एकमेकांशी आदळू शकतात ज्यामुळे असह्य वेदना आणि शारीरिक त्रास होऊ शकतो [
3]. वेदना, सूज आणि सांध्यातील कडकपणा यासारख्या लक्षणांसह दाहक मध्यस्थांचा सहभाग चांगल्या प्रकारे नोंदवलेला आहे. OA रुग्णांमध्ये, दाहक सायटोकिन्स, ज्यामुळे उपास्थि आणि सबकॉन्ड्रल हाडांचे क्षरण होते, ते सायनोव्हियल द्रवपदार्थात आढळतात [
4]. OA रुग्णांना सामान्यतः दोन प्रमुख तक्रारी असतात त्या म्हणजे वेदना आणि सायनोव्हियल सूज. म्हणून सध्याच्या OA उपचारपद्धतींचे प्राथमिक उद्दिष्ट वेदना आणि सूज कमी करणे आहे. [
5]. जरी उपलब्ध OA उपचार, ज्यामध्ये नॉन-स्टेरॉइडल आणि स्टेरॉइडल औषधे समाविष्ट आहेत, वेदना आणि जळजळ कमी करण्यात प्रभावी असल्याचे सिद्ध झाले आहे, परंतु या औषधांच्या दीर्घकालीन वापरामुळे हृदय व रक्तवाहिन्यासंबंधी, पोट-आतड्यांसंबंधी आणि मूत्रपिंडाच्या बिघाड यासारखे गंभीर आरोग्य परिणाम होतात [
6]. अशाप्रकारे, ऑस्टियोआर्थरायटिसच्या उपचारांसाठी कमी दुष्परिणामांसह अधिक प्रभावी औषध विकसित करावे लागेल.
नैसर्गिक आरोग्य उत्पादने सुरक्षित आणि सहज उपलब्ध असल्याने वाढत्या प्रमाणात लोकप्रिय होत आहेत [
7]. पारंपारिक कोरियन औषधांनी संधिवातासह अनेक दाहक रोगांवर प्रभावीपणा सिद्ध केला आहे [
8]. ऑकलंडिया लप्पा डीसी. हे त्याच्या औषधी गुणधर्मांसाठी ओळखले जाते, जसे की वेदना कमी करण्यासाठी आणि पोट शांत करण्यासाठी क्यूईचे रक्ताभिसरण वाढवणे, आणि पारंपारिकपणे नैसर्गिक वेदनाशामक म्हणून वापरले जाते [
9]. मागील अहवालांवरून असे दिसून येते की ए. लप्पामध्ये दाहक-विरोधी गुणधर्म आहेत [
10,
11], वेदनाशामक [
12], कर्करोगविरोधी [
13], आणि गॅस्ट्रोप्रोटेक्टिव्ह [
14] परिणाम. ए. लप्पाच्या विविध जैविक क्रिया त्याच्या प्रमुख सक्रिय संयुगांमुळे होतात: कॉस्टुनोलाइड, डिहायड्रोकॉस्टस लैक्टोन, डायहायड्रोकॉस्टुनोलाइड, कॉस्टुसलॅक्टोन, α-कोस्टोल, सॉसुरिया लैक्टोन आणि कॉस्टुसलॅक्टोन [
15]. पूर्वीच्या अभ्यासात असा दावा करण्यात आला आहे की कॉस्टुनोलाइडने लिपोपॉलिसॅकराइड (LPS) मध्ये दाहक-विरोधी गुणधर्म दाखवले होते, ज्यामुळे NF-kB आणि उष्मा शॉक प्रोटीन मार्गाच्या नियमनातून मॅक्रोफेजना प्रेरित केले [
16,
17]. तथापि, कोणत्याही अभ्यासात OA उपचारांसाठी A. lappa च्या संभाव्य क्रियाकलापांची तपासणी केलेली नाही. सध्याच्या संशोधनात (मोनोसोडियम-आयोडोएसीटेट) MIA आणि एसिटिक आम्ल-प्रेरित उंदीर मॉडेल्स वापरून OA विरुद्ध A. lappa च्या उपचारात्मक परिणामांची तपासणी केली आहे.
मोनोसोडियम-आयोडोएसीटेट (MIA) हे प्राण्यांमध्ये वेदनांचे बरेच प्रकार आणि OA चे पॅथोफिजियोलॉजिकल वैशिष्ट्ये निर्माण करण्यासाठी प्रसिद्ध आहे [
18,
19,
20]. गुडघ्याच्या सांध्यामध्ये इंजेक्शन दिल्यावर, MIA कॉन्ड्रोसाइट चयापचय विस्कळीत करते आणि जळजळ आणि दाहक लक्षणे निर्माण करते, जसे की कार्टिलेज आणि सबकॉन्ड्रल हाडांची झीज, OA ची मुख्य लक्षणे [
18]. अ‍ॅसिटिक अ‍ॅसिडमुळे होणारा राइटिंग रिस्पॉन्स हा प्राण्यांमध्ये परिधीय वेदनांचे अनुकरण म्हणून मोठ्या प्रमाणात मानला जातो जिथे दाहक वेदना परिमाणात्मकपणे मोजता येतात [
19]. माऊस मॅक्रोफेज सेल लाइन, RAW264.7, जळजळीच्या पेशींच्या प्रतिसादांचा अभ्यास करण्यासाठी लोकप्रियपणे वापरली जाते. LPS सह सक्रिय झाल्यावर, RAW264 मॅक्रोफेज दाहक मार्ग सक्रिय करतात आणि TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS आणि IL-6 सारखे अनेक दाहक मध्यस्थ स्राव करतात [
20]. या अभ्यासात MIA प्राणी मॉडेल, एसिटिक आम्ल-प्रेरित प्राणी मॉडेल आणि LPS-सक्रिय RAW264.7 पेशींमध्ये OA विरुद्ध A. lappa च्या अँटी-नोसिसेप्टिव्ह आणि अँटी-इंफ्लेमेटरी प्रभावांचे मूल्यांकन केले आहे.
२. साहित्य आणि पद्धती
२.१. वनस्पती साहित्य
प्रयोगात वापरलेले ए. लप्पा डीसी. चे वाळलेले मूळ एपुलिप फार्मास्युटिकल कंपनी लिमिटेड (सोल, कोरिया) कडून मिळवले गेले होते. ते गॅचोन विद्यापीठातील कोरियन मेडिसिनचे कर्नल, हर्बल फार्माकोलॉजी विभागाचे प्रो. डोंगुन ली यांनी ओळखले आणि व्हाउचर नमुना क्रमांक १८०६०३०१ म्हणून जमा करण्यात आला.
२.२. ए. लप्पा अर्काचे एचपीएलसी विश्लेषण
ए. लप्पा रिफ्लक्स उपकरण वापरून काढला गेला (डिस्टिल्ड वॉटर, १०० डिग्री सेल्सिअस तापमानात ३ तास). काढलेले द्रावण कमी दाबाच्या बाष्पीभवन यंत्राचा वापर करून फिल्टर आणि घनरूप केले गेले. ए. लप्पा अर्क -८० डिग्री सेल्सिअस तापमानाखाली फ्रीझ-ड्राय केल्यानंतर ४४.६९% उत्पादन मिळाले. ए. लप्पाचे क्रोमॅटोग्राफिक विश्लेषण १२६० इन्फिनिटीⅡ एचपीएलसी-सिस्टम (एजिलेंट, पाल अल्टो, सीए, यूएसए) वापरून जोडलेल्या एचपीएलसीसह केले गेले. क्रोमॅटिक पृथक्करणासाठी, ३५ डिग्री सेल्सिअस तापमानावर एलिप्सएक्सडीबी सी१८ कॉलम (४.६ × २५० मिमी, ५ µm, एजिलेंट) वापरण्यात आला. एकूण १०० मिलीग्राम नमुना ५०% मिथेनॉलच्या १० मिलीमध्ये पातळ केला गेला आणि १० मिनिटांसाठी सोनिकेट केला गेला. नमुने ०.४५ μm च्या सिरिंज फिल्टर (वॉटर्स कॉर्प., मिलफोर्ड, एमए, यूएसए) ने फिल्टर केले गेले. मोबाइल फेज रचना ०.१% फॉस्फोरिक आम्ल (A) आणि एसीटोनिट्राइल (B) होती आणि स्तंभ खालीलप्रमाणे विभाजित केला गेला: ०–६० मिनिटे, ०%; ६०–६५ मिनिटे, १००%; ६५–६७ मिनिटे, १००%; ६७–७२ मिनिटे, ०% द्रावक B ज्याचा प्रवाह दर १.० मिली/मिनिट आहे. १० μL च्या इंजेक्शन व्हॉल्यूमचा वापर करून २१० nm वर सांडपाणी निरीक्षण केले गेले. विश्लेषण तीन प्रतींमध्ये केले गेले.
२.३. प्राण्यांचे निवासस्थान आणि व्यवस्थापन
५ आठवडे वयाचे नर स्प्रेग-डॉली (एसडी) उंदीर आणि ६ आठवडे वयाचे नर आयसीआर उंदीर हे समताको बायो कोरिया (ग्योंगी-डो, कोरिया) येथून खरेदी करण्यात आले. प्राण्यांना स्थिर तापमान (२२ ± २ °से) आणि आर्द्रता (५५ ± १०%) आणि १२/१२ तासांच्या प्रकाश/अंधार चक्राचा वापर करून एका खोलीत ठेवण्यात आले. प्रयोग सुरू होण्यापूर्वी एका आठवड्यापेक्षा जास्त काळ प्राण्यांना या स्थितीची माहिती देण्यात आली. प्राण्यांना खाद्य आणि पाण्याचा पुरवठा मर्यादित होता. गॅचॉन विद्यापीठात (GIACUC-R2019003) प्राण्यांची काळजी आणि हाताळणीसाठी सध्याचे नैतिक नियम सर्व प्राण्यांच्या प्रायोगिक प्रक्रियांमध्ये काटेकोरपणे पाळले गेले. हा अभ्यास अन्वेषक-अंध आणि समांतर चाचणीसाठी डिझाइन करण्यात आला होता. आम्ही प्राणी प्रायोगिक नीतिमत्ता समितीच्या मार्गदर्शक तत्त्वांनुसार इच्छामृत्यू पद्धत पाळली.
२.४. एमआयए इंजेक्शन आणि उपचार
उंदरांना यादृच्छिकपणे ४ गटांमध्ये विभागण्यात आले, ते म्हणजे शॅम, कंट्रोल, इंडोमेथेसिन आणि ए. लप्पा. २% आयसोफ्लोरेन O2 मिश्रणाने भूल देऊन, उंदरांना ५० μL MIA (४० mg/m; सिग्मा-अल्ड्रिच, सेंट लुईस, MO, USA) गुडघ्याच्या सांध्यामध्ये इंट्रा-आर्टिक्युलरली इंजेक्शन देण्यात आले जेणेकरून प्रायोगिक OA होईल. उपचार खालीलप्रमाणे केले गेले: नियंत्रण आणि शॅम गटांना फक्त AIN-93G मूलभूत आहारासह राखले गेले. फक्त, इंडोमेथेसिन गटाला AIN-93G आहारात समाविष्ट केलेले इंडोमेथेसिन (३ mg/kg) आणि A. लप्पा ३०० mg/kg गटाला A. लप्पा (३०० mg/kg) सह पूरक AIN-93G आहार देण्यात आला. OA प्रेरणेच्या दिवसापासून दररोज १९०-२१० ग्रॅम शरीराच्या वजनासाठी १५-१७ ग्रॅम दराने उपचार २४ दिवस चालू ठेवण्यात आले.
२.५. वजन उचलण्याचे मापन
OA प्रेरणानंतर, उंदरांच्या मागच्या अवयवांचे वजन सहन करण्याची क्षमता मोजमाप वेळापत्रकानुसार इनकॅपॅसिटीन्स-मीटरटेस्टर६०० (IITC लाईफ सायन्स, वुडलँड हिल्स, CA, USA) वापरून केले गेले. मागच्या अवयवांवरील वजन वितरण मोजण्यात आले: वजन सहन करण्याची क्षमता (%).
